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Amplyus熱循環(huán)儀(miniPCR)工作原理詳解

更新時(shí)間:2025-10-29點(diǎn)擊次數(shù):105

?? 儀器概覽

Amplyus熱循環(huán)儀(miniPCR)是一款結(jié)構(gòu)緊湊的PCR儀,旨在讓PCR實(shí)驗(yàn)變得簡(jiǎn)單易行。它通過(guò)USB連接,可使用專用軟件進(jìn)行協(xié)議的創(chuàng)建、保存以及監(jiān)控工作狀態(tài)。即使僅靠主機(jī)本身運(yùn)行,用戶也能通過(guò)機(jī)身的LED顯示快速了解當(dāng)前的運(yùn)行模式。

該熱循環(huán)儀支持8×0.2ml的PCR管(兼容條紋管),采用PID控制方式進(jìn)行溫度控制,其溫變速率最高可達(dá)升溫3.2℃/秒,降溫2.2℃/秒。

?? 工作原理

PCR技術(shù)的本質(zhì)是通過(guò)變性、退火、延伸三個(gè)步驟的循環(huán),對(duì)特定的DNA序列進(jìn)行指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。Amplyus熱循環(huán)儀(miniPCR)的核心工作原理就是精確控制這三個(gè)步驟的溫度轉(zhuǎn)換與持續(xù)時(shí)間。

  1. 溫度控制機(jī)制

    • PID溫度控制:儀器采用PID(比例-積分-微分)控制算法,這種控制方式能夠?qū)崿F(xiàn)快速、穩(wěn)定的溫度控制。它通過(guò)實(shí)時(shí)計(jì)算設(shè)定溫度與實(shí)際溫度之間的誤差,并據(jù)此調(diào)整加熱或制冷功率,最大限度地減小溫度過(guò)沖和波動(dòng),確保每個(gè)溫度步驟的精確性。

    • 高效溫變系統(tǒng):儀器集成了高效的加熱和制冷元件,能夠?qū)崿F(xiàn)最大3.2℃/秒的升溫速率和2.2℃/秒的降溫速率。這種快速的溫度轉(zhuǎn)換不僅縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,也有助于提高擴(kuò)增特異性,減少非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生。

  2. 工作流程與程序控制

    • 變性:通常在94-95°C下進(jìn)行,使雙鏈DNA解鏈為單鏈。

    • 退火:溫度降至50-65°C(根據(jù)引物的Tm值設(shè)定),使引物與模板DNA特異性結(jié)合。

    • 延伸:一般在72°C左右(耐熱DNA聚合酶的最適溫度),聚合酶沿模板合成新的DNA鏈。

    • 基本PCR循環(huán)

    • 程序設(shè)置與存儲(chǔ):Amplyus熱循環(huán)儀(miniPCR)主機(jī)可保存1個(gè)預(yù)設(shè)協(xié)議。通過(guò)USB連接到電腦(支持Windows和Mac系統(tǒng))或Android設(shè)備,用戶可以利用專用軟件創(chuàng)建新的實(shí)驗(yàn)方案,并監(jiān)控儀器的實(shí)時(shí)運(yùn)行狀態(tài)。軟件控制提供了更豐富的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可能性,例如設(shè)置多步循環(huán)、調(diào)節(jié)溫度轉(zhuǎn)換速率等。

  3. 關(guān)鍵性能參數(shù)

    • 溫度范圍:可在環(huán)境溫度至99°C之間運(yùn)行。

    • 溫控精度:采用PID控制方式,確保了良好的溫度準(zhǔn)確性和均勻性。

    • 電源要求:支持AC 100-240V,50/60Hz的寬電壓輸入,功耗約為70W。

?? 應(yīng)用場(chǎng)景

Amplyus熱循環(huán)儀(miniPCR)雖然體積小巧,但功能全面,可應(yīng)用于多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景:

  • 基因擴(kuò)增:用于常規(guī)DNA片段擴(kuò)增,如基因克隆、基因分型等。

  • 教學(xué)演示:其緊湊的設(shè)計(jì)和直觀的操作(可通過(guò)主機(jī)LED顯示了解運(yùn)行模式)非常適合于實(shí)驗(yàn)室教學(xué)和學(xué)生實(shí)踐。

  • 快速檢測(cè):可用于一些簡(jiǎn)單的PCR快速檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。

  • 野外研究:考慮到其相對(duì)便攜的設(shè)計(jì)(具體便攜程度需參考更多產(chǎn)品信息),也可能適用于野外或現(xiàn)場(chǎng)的基礎(chǔ)分子生物學(xué)研究。

?? 操作指南

  1. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

    • 在冰上配制PCR反應(yīng)體系,包括DNA模板、引物、dNTPs、緩沖液和耐熱DNA聚合酶。

    • 將反應(yīng)液分裝至0.2ml PCR管中,確保管壁無(wú)液體殘留,然后蓋緊管蓋。

  2. 儀器操作

    • 接通電源,打開(kāi)儀器開(kāi)關(guān)。

    • 直接在主機(jī)的LED顯示上查看當(dāng)前的運(yùn)行模式,或通過(guò)USB連接至電腦(支持Windows和Mac系統(tǒng))或Android設(shè)備。

    • 在專用軟件上創(chuàng)建或選擇所需的PCR程序,設(shè)置變性、退火、延伸各階段的溫度和時(shí)間以及循環(huán)數(shù)。

    • 將PCR管放入加熱模塊,啟動(dòng)運(yùn)行程序。

  3. 注意事項(xiàng)

    • 避免在儀器運(yùn)行過(guò)程中強(qiáng)行打開(kāi)熱蓋。

    • 定期清潔加熱模塊,防止樣品污染。

    • 注意儀器運(yùn)行時(shí)的環(huán)境溫度,確保通風(fēng)良好。

Amplyus熱循環(huán)儀(miniPCR)通過(guò)其緊湊的設(shè)計(jì)、便捷的軟件控制以及可靠的PID溫控系統(tǒng),將PCR技術(shù)變得更為簡(jiǎn)單和易于使用。無(wú)論是用于常規(guī)基因擴(kuò)增還是教學(xué)演示,它都能提供穩(wěn)定可靠的性能,是現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中一個(gè)實(shí)用且高效的工具。


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